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山li醇脫氫酶試劑盒 糖代謝系列-常備現貨
簡要描述:

SH(EC 1.1.1.14)催化山li醇脫氫生成果糖,是調控生物體內山li醇含量的關健酶之一。
山li醇脫氫酶試劑盒 糖代謝系列-常備現貨

  • 產品型號:BI6012
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2025-07-17
  • 訪  問  量:146
詳情介紹


山li醇脫氫酶(sorbitol dehydrogenase,SH)試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

SH(EC 1.1.1.14)催化山li醇脫氫生成果糖,是調控生物體內山li醇含量的關健酶之一。

測定原理:

SH 催化山li醇脫氫生成果糖,同時還原 NAD+生成NADH,測定 340nm 吸光度增加速率可以計算 SH活性。

山li醇脫氫酶試劑盒   糖代謝系列-常備現貨

組成:

產品名稱

BI6012-50T/48S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

20ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:粉劑

1

-20℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 15ml 蒸餾水,用不完的試劑仍 4℃保存。 試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入15ml 蒸餾水,用不完的試劑仍-20℃保存。


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


自備儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提取:

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(ml) 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml) 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

試劑名稱(μl)

測定管

試劑一

400

試劑二

300

試劑三

300






混勻,37℃(哺乳動物) 25℃(其它物種)準確水浴 5min


將上述試劑按順序加入 1 ml 玻璃比色皿中,加樣本的同時開始計時,記錄 20 秒時的初始吸光度A1  2 20 秒時的吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

SH 活性計算:

1、血清(漿)SH 活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

SH(nmol/min/ml)= [ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣÷T=1688×ΔA 2、組織、細菌或細胞中 SH 活力的計算:

(1) 按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

SH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1688×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

SH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=1688×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

SH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=3.376×ΔA

V 反總:反應體系總體積,1.05×10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑, 1cm;V 樣:加入樣本體積,0.05 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

山li醇脫氫酶試劑盒   糖代謝系列-常備現貨


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